生物偶联/标记技术是指通过化学或生物方法，将两种或两种以上具有不同功能的生物分子（如蛋白质、核酸、多糖、抗体、酶）或非生物分子（如药物小分子、荧光探针、纳米颗粒）共价或非共价连接，形成具有复合功能的偶联物的技术。其核心目的是整合不同分子的优势特性，实现单一分子无法完成的生物功能。生物偶联技术具有重要的应用前景，如生物医药领域、疾病诊断、生物材料与生物技术领域、细胞生理相关的生命科学研究等。
生物化学偶联技术在免疫学中应用尤为普遍，其本质是通过分子偶联实现特异性识别与信号放大的结合，大幅提升检测的灵敏度、特异性和准确性。例如体外诊断（IVD）试剂的制备，生物传感器的构建，免疫标记与示踪研究，疫苗研发与免疫效果评价，免疫细胞功能调控，如下表举例所示。
| 效应物 | 标记物（修饰物） | 用途 |
|---|---|---|
| 抗体 | 荧光染料(FITC, Fluor647，RPE,APC, 吖啶酯) | 免疫学实验(IP,FC,FACS, 活体成像，多色ELISA，多色WB，化学发光...) |
| 抗体 | 酶（HRP，ALP） | 免疫学实验（ELISA, IHC/ICC,WB ...） |
| 抗体 | 生物素 | 增强抗体的通用性、蛋白纯化、信号放大、细胞分选... |
| 抗体、蛋白、多肽 | PEG | 增强溶解度，增强抗降解性 |
| 抗体、蛋白 | 胶体金 | POCT、侧向流层析 |
| 蛋白 | 荧光染料 | FRET，蛋白定量，MST，IF,基于Annexin V 的 细胞凋亡检测,... |
| 核酸、核苷酸 | 荧光染料 | 探针制备，FISH, 荧光定量PCR, 核酸定量，TUNEL细胞凋亡检测... |
| 抗体蛋白 | 磁珠、微球 | 纯化蛋白,IP,CO-IP, CBA多因子检测... |
| 小分子 | BSA，OVA | 免疫原制备，抗体开发，ELISA |
| 小分子 | 荧光染料 | 分子示踪，探针开发 |
| 蛋白1 | 蛋白2 | 功能蛋白，特定用途 |
| ... | ... |
EnkiLife可为您提供各种荧光分子\荧光蛋白标记、生物素标记、胶体金标记及HRP\ALP标记等标记服务或特定产品定制服务、化学修饰服务。
- 标记偶联服务种类丰富；
- 流程体系成熟，效率高；
- 多年研发标记/偶联经验，技术方法可靠；
| 技术服务流程 | 具体内容 | 服务周期（收样后3~15个工作日） |
|---|---|---|
| 1、项目咨询与需求确认 | 客户提供抗体\蛋白信息（物种、浓度、纯度、储存条件等） 明确标记/修饰需求（如荧光染料类型、修饰位点等） 技术团队评估可行性，并提供初步方案（标记策略、QC标准等、标记服务合同） | 1~3个工作日 |
| 2、样品接收与预处理 | 样品登记、分装保存（2-8℃或-20℃） 预处理（脱盐、缓冲液置换等） | 1~3个工作日 |
| 3、标记/修饰实验 | 活化染料→偶联反应→纯化→浓缩 | 小分子染料（氨基位点）：2~7个工作日，根据荧光染料类型来定； 小分子染料（其他位点）：5~10个工作日，根据荧光染料类型及待标记物性质来定； 大分子染料及其他：3~12个工作日，根据荧光染料\蛋白类型及标记位点来定； |
| 4、质量控制（QC） | 可选：纯度分析、标记效率、活性检测 可选：稳定性测试（4℃/37℃储存） | 1~5个工作日 根据实际情况确定 |
| 5、数据报告与样品交付 | 实验步骤、QC数据、标记/修饰参数、储存； 标记后蛋白/抗体（液体或冻干粉）； 电子版报告（PDF，word）+ 原始数据图片（Excel/仪器导出文件等） | 1个工作日 |
| 6. 售后支持 | 免费技术咨询（3个月内）； 重复实验（重做或协商折扣）； |
1、可接收的待标记样品包含各种抗体分子、纳米抗体、ADC、可溶性蛋白、多肽、小分子化合物、某些多糖、核酸或者核苷酸等。
2、可提供标记服务的标记物有：
- A.酶标记物：辣根过氧化物酶（HRP）,碱性磷酸酶（AP/ALP）；
- B.各种生物素（Biotin）：长臂生物素、二硫生物素、PEG生物素；
- C.常规经典荧光染料：FITC，Rhodamine B（RBITC）,Texas red, AMCA等；
- D.Fluor系列或Alexa Fluor荧光：350，405，430，488，532，555，568，594，647，660，680，700，750等；
- E.Cy系列荧光：Cy2，Cy3，Cy3.5，Cy5，Cy5.5，Cy7，Cy7.5；
- F.荧光蛋白：藻红蛋白（PE），别藻蓝蛋白（APC）,PerCP；
- G.串联荧光染料：PE-Cy/Fluor荧光素系列：PE-Cy5，PE-Fluor647，PE-Cy5.5，PE-Fluor594，PE-Fluor680，PE-Fluor750，PE-Cy7等；APC-Cy/Fluor荧光素系列：APC-Cy5.5，APC-Fluor700，APC-Cy7等；PerCP-Cy/Fluor荧光素系列：PerCP-Cy5.5，PerCP-Fluor680等；
- H.胶体金：20nm，30nm，40nm，50nm，60nm，70nm；
- I.量子点：Em-525nm,Em-565nm,Em-605nm,Em-625nm,Em-650nm；
- J.其他偶联标记定制需求。
Tip1: 部分标记物性质说明参见荧光染料或标记物特征介绍或者标记试剂盒选择参考
Tip2: 请您填写标记服务需求表，以便我们为您提供更好的技术服务。
- 待标记样品需保证90%以上的纯度，根据标记工艺需求，样品中不含有干扰标记物结合的成分。
- 不同标记物最小标记量不同，对于常用的小分子荧光染料\生物素\酶等，一般需要抗体、蛋白最小标记量100ug，对于胶体金\串联荧光染料\量子点及其他等，可根据具体样本及标记物进行沟通，一般需要抗体、蛋白1mg以上，最好是干粉，如果是液体，浓度应大于1mg/ml。
- 抗体IgG样品中应不含BSA、明胶、叠氮钠、甘氨酸、Tris等成分,如果有相关成分，请提前告知。
- 大分子蛋白或某些特殊抗体（或抗体片段）应提供分子量、等电点、缓冲液成分、关键氨基酸及pH等信息。
- 多肽需提供氨基酸序列。
- 小分子化合物需提供分子结构式，CAS号或完整的化学物理性质信息，具体服务请咨询客服。
案例1：一抗UCH-L1/PGP9.5兔多抗 标Fluor555荧光
4%多聚甲醛固定的小鼠脑组织直接法免疫荧光检测
Fluor555-rabbit anti UCH-L1/PGP9.5 0.5mg/ml ,1:200稀释，结果显示Fluor555直接标记的一抗进行免疫荧光，效果良好；
视野一（橙红色：Fluor555荧光，示UCH-L1/PGP9.5靶标；蓝色：DAPI荧光，示细胞核）
视野二（橙红色：Fluor555荧光，示UCH-L1/PGP9.5靶标；蓝色：DAPI荧光，示细胞核）
案例2 ：流式抗体开发
PE荧光蛋白标记两款anti mouse CD4单抗，小鼠脾脏细胞分离制备细胞悬液，细胞裂红后，10^6个细胞/Test，流式检测，结果显示两个不同厂家的mouse CD4单抗标记PE后，阴阳分群明显，且荧光亮度较高，即使稀释多倍后，荧光亮度依然保持较高水平。
1: PE标记的一号anti mouse CD4单抗-0.2ug ，10^6个细胞；
2: PE标记的一号anti mouse CD4单抗-0.05ug ，10^6个细胞
3: PE标记的二号anti mouse CD4单抗-0.2ug ，10^6个细胞；
4: PE标记的二号anti mouse CD4单抗-0.05ug ，10^6个细胞；
EnkiLife提供40多种抗体标记试剂盒产品，包括小分子荧光染料，生物素，HRP酶，串联荧光染料、功能蛋白等，另有多种其他标记产品开发中，可满足多场景的免疫学实验需求。
EnkiLife提供近700种标记二抗产品及链霉亲和素产品，包括多种荧光染料，生物素，HRP酶等，可满足多场景的免疫学、生命科学研究需求。