TSA技术服务
技术介绍
酪酰胺信号放大（TSA）是一种基于辣根过氧化酶（HRP）的催化活性对靶蛋白或核酸进行高密度原位标记的酶学检测方法。原理为酪胺Tyramide的过氧化物酶反应（已标记荧光的酪胺在HRP催化H2O2下形成共价键结合位点）产生的大量酶促产物与目标蛋白的酪氨酸残基共价结合，从而使目标蛋白标记上特异的荧光。
实验原理
服务项目
| 分类 | 服务项目 | 备注 |
|---|---|---|
| IF荧光染色 | 免疫荧光单标 | 不含一抗，含二抗(兔/小鼠/大鼠)、DAPI |
| 免疫荧光双标 | 常规为不同种属一抗分别标记；不含一抗，含二抗(兔/小鼠/大鼠)、DAPI | |
| 免疫荧光三标 | 不含一抗，含二抗(兔/小鼠/大鼠)、DAPI | |
| 免疫荧光四标 | 不含一抗，含二抗(兔/小鼠/大鼠)、DAPI； 需要提供多余白片做单标预实验。例如:10例样本做5标，其中目的片子提供10张，另选择样本A提供5-10张白片，分别做5色的单标，预实验成功再进行正式实验 | |
| 免疫荧光五标 | ||
| 荧光全景扫描 | 荧光单标 双色全景扫描 | 提供读片软件及原始相关文件，荧光扫描波长范围 |
| 荧光双标 3色全景扫描 | ||
| 荧光三标 4色全景扫描 | ||
| 荧光四标 5色全景扫描 | ||
| 荧光五标 6色全景扫描 | ||
| 荧光六标 7色全景扫描 | ||
| 超多标染色 | 免疫荧光6标+扫描 | 实验检测+图像采集 |
| 免疫荧光7标+扫描 | ||
| 免疫荧光8标+扫描 | ||
| 免疫荧光9标+扫描 | ||
| 免疫荧光10标以上 | ||
| 病理分析（5标及以下） | 免疫组化（阳性细胞数量） | 全景扫描或者截图3张 包含：阳性细胞比率、阳性细胞密度、平均光密度值、H-Score。一次分析即可获取该指标阳性细胞数量相关参数的四个数值，以上相关参数均可用于评价阳性强弱多少。 |
| 免疫组化（阳性面积） | 全景扫描或者截图3张 包含：H-score、平均光密度值、阳性面积比、阳性面积密度。一次分析即可获取该指标阳性细胞数量相关参数的四个数值，以上相关参数均可用于评价阳性强弱多少。 | |
| 免疫荧光（阳性细胞数量） | 全景扫描或者截图3张 按靶标数量，累计计费。包含：阳性细胞比率、阳性细胞密度、平均光密度值。一次分析即可获取该指标阳性细胞数量相关参数的三个数值。以上相关参数均可用于评价阳性强弱多少。 | |
| 免疫荧光（共定位计数） | 全景扫描或者截图3张 可分析每两个指标或多个指标的共定位阳性面积相关参数,可根据需求选择需要共定位分析的指标组合，累计计费。 | |
| 免疫荧光（临近度分析） | 全景扫描或者截图3张 统计A细胞指定范围内，B细胞分布数量；按每张图片分析的组合数量，累计计费 | |
| 免疫荧光（细胞密度分析） | 全景扫描或者截图3张 从对象数据中测量特定半径内选定的细胞密度，累计计费 | |
| 免疫荧光（浸润分析） | 全景扫描或者截图3张 统计指定的免疫细胞在肿瘤边界内外一定范围内的分布数量；按每张图片分析的免疫细胞类型数量，累计计费，仅针对炎症指标（例：F4/80,CD68等） |
案例分析
检测样本：大鼠肾脏
AQP4：在内髓集合管和皮质/外髓集合管的主细胞可见阳性染色；
CD31：广泛用于标记血管内皮，肾小球毛细血管内皮、各级血管内皮中均有表达；
TGFβ1：在高血压、纤维化模型中表达显著上调，肾小球上皮细胞（主要是足细胞）、间质成纤维细胞中表达；
Zo-1：作为紧密连接支架蛋白，维持肾小球滤过屏障和肾小管极性；
Collagen I：在纤维化或硬化模型中大量沉积于间质及肾小球。