抗体标记服务
抗体标记的常见类型:
荧光标记:抗体与荧光染料(如FITC、TRITC、Alexa Fluor、Cy系列等)结合,用于荧光显微镜下的检测。
酶标记:抗体与酶(如辣根过氧化物酶HRP或碱性磷酸酶AP)结合,通过酶催化底物产生可检测的信号。
金标记:抗体与纳米级金颗粒结合,用于电子显微镜下的检测或作为免疫金染色的一部分。
生物素标记:抗体与生物素结合,可以与链霉亲和素或亲和素结合,用于增强检测信号。
放射性同位素标记:抗体与放射性同位素(如碘-125或铀-14)结合,用于放射免疫分析。
抗体标记的步骤:
选择抗体:根据实验目的选择合适的特异性抗体。
标记物选择:根据检测方法选择合适的标记物。
抗体纯化:确保抗体的纯度,以减少非特异性结合。
标记反应:将抗体与标记物通过化学方法结合。例如,荧光染料可以通过赖氨酸残基或半胱氨酸残基与抗体结合。
纯化标记抗体:标记后,需要纯化以去除未结合的标记物和聚合体。
活性检测:检查标记后的抗体是否保持了原有的抗原结合活性。
稳定性和储存:评估标记抗体的稳定性,并根据需要进行适当的储存。
应用示例:
免疫荧光:使用荧光标记的抗体在细胞或组织切片上检测特定蛋白质。
酶联免疫吸附试验(ELISA):使用酶标记的抗体检测特定抗原,通过颜色变化定量分析。
免疫印迹(Western Blot):使用酶标记或荧光标记的抗体检测特定蛋白质在凝胶电泳后的转移膜上。
免疫组化:使用酶标记或荧光标记的抗体在组织切片上定位特定抗原。