稳转细胞系构建服务

稳转细胞系构建服务 - EnkiLife (优势独立版)

稳转细胞系 是指通过基因工程手段将目的基因整合至宿主细胞基因组,经药物筛选获得长期稳定表达目标基因的单克隆细胞株。作为连接基因型与表型的核心工具,它为生命科学研究与生物产业化提供可重复、可量化的实验平台,是现代实验室的"生产力"标配。

基因功能研究恰似破译生命"使用说明书",不仅揭示生命本质,更推动医学、农业与生物技术的创新。明确基因功能是寻找药物靶点的第一步,稳转细胞系正是这一过程的黄金起点。

稳转细胞系分类

稳转细胞系基因调控策略表达特点
基因过表达(Overexpression)细胞系外源基因强制表达慢病毒载体表达,mRNA和蛋白水平显著高于内源(数倍至数百倍)
基因干扰(Knockdown)细胞系shRNA/siRNA介导利用RNA干扰技术,基因表达被"消减"但未完全消除(70-90%抑制)
基因敲除(Knockout)细胞系CRISPR-Cas9基因编辑通过基因编辑使基因功能完全丧失(移码突变或大片段缺失)
基因诱导表达(Inducible)细胞系Tet-On/Tet-Off系统表达处于"待机"状态,诱导剂可控激活
报告基因(Reporter)细胞系荧光蛋白/荧光素酶融合表达实时可视化基因表达或蛋白定位及与其他分子的相互作用

基因操作技术路线

慢病毒系统

高滴度病毒包装,感染分裂/非分裂细胞,目的基因稳定整合,适用于难转染细胞及长期稳定表达。

电穿孔转染

物理方法将载体直接导入细胞,配合抗性筛选,获得单克隆,适合悬浮细胞或对病毒不敏感的细胞系。

CRISPR-Cas9

精准基因编辑,可实现基因敲除、点突变或大片段插入,完全消除或改造目标基因功能。

服务项目

基因过表达细胞系

目的基因强制表达,蛋白水平显著升高,适用于功能增益、蛋白生产等。

  • 功能增益研究 (Gain-of-function)
  • 重组蛋白/抗体生产
  • 药物靶点验证
过表达
图片参考文献TRAF3IP3过表达A549/PC9细胞 (Adv Sci. 2025)

基因干扰细胞系

shRNA介导,70-90%表达抑制,模拟功能缺失表型。

  • 功能缺失模拟 (Loss-of-function)
  • 代谢通路研究
  • 耐药机制解析
敲低
图片参考文献Dusp18干扰MC38细胞 (Nat Commun. 2024)

基因敲除细胞系

CRISPR-Cas9精确编辑,功能完全丧失,构建疾病模型。

  • 致死基因机制研究
  • 疾病模型构建
  • 药物靶点筛选
敲除
图片参考文献GUK1敲除MGH045-1 (Cell. 2025)

服务流程

过表达 · 干扰 · 敲除 — 标准化质控,确保构建成功率

01
载体构建
基因合成/克隆
载体优化
02
病毒包装
慢病毒包装
滴度质控
03
细胞转导
感染条件优化
MOI测试
04
药物筛选
抗性筛选
加压培养
05
目的基因表达水平检测
QPCR检测
WB验证

服务优势 · 全链条保障

从验证到交付,每一个环节都经得起文献发表标准的检验

WB验证服务

订购稳转细胞系即赠送Western blot验证,全膜曝光,Marker和目的条带清晰可辨,满足文章发表要求。

top级文献标准

抗体支持

EnkiLife上线抗体免费使用及验证,无需客户提供抗体,省时省心。

免费使用

细胞保证

提供原始细胞STR鉴定报告,确保遗传背景清晰。

STR鉴定

周期承诺

标准项目8-12周交付:过表达/干扰8-10周;敲除10-12周;诱导系统12-14周,准时交付。

高效可靠

售后支持

技术答疑,提供细胞复苏冻存protocol及常见问题解决方案。

全程陪伴

限时好礼 · 订购即赠WB验证

全膜曝光(含Marker),条带清晰,满足高分文章要求;无需自备EnkiLife上线抗体,EnkiLife自有单克隆抗体库免费用于验证!


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