产品简介
HRP（辣根过氧化物酶）是从辣根根部提取的氧化还原酶，可催化过氧化氢（H₂O₂）对底物的氧化反应，生成有色或荧光产物。广泛应用于ELISA、WB、原位杂交及生物传感器等领域。
产品特点
- 操作简便：组分齐全，按流程操作即可获得高品质偶联抗体
- 高纯度HRP：催化效率高，底物反应灵敏度提升
- 定向偶联技术：HRP与抗体无自连，偶联物均一稳定
- 延长臂交联剂：消除蛋白质空间位阻，确保应用效果
标记原理
图示：抗体Fc区域氨基酸与HRP上特定氨基酸通过交联剂定向偶联
产品组分
| 产品组分 | 80μg抗体规格 | 400μg抗体规格 | 4mg抗体规格 | 储存条件 |
|---|---|---|---|---|
| 活化的HRP | 1管 | 5管 | 5管 | -20℃, 避光 |
| 标记缓冲液H | 5 mL | 5 mL | 5 mL | 4℃, 避光 |
| 抗体修饰试剂 | 60 μL | 60 μL | 60 μL×2支 | -20℃, 避光 |
| 50 KD超滤管 | 1套* | 1套* | 1套* | 室温 |
| 封闭试剂 | 300 μg | 300 μg | 300 μg×4支 | -20℃, 避光 |
| DMSO（溶解封闭试剂） | 50 μL | 50 μL | 200 μL | -20℃, 避光 |
| HRP标记抗体保存液 | 1 mL | 1 mL | 5 mL | 2~8℃ |
| 建议标记抗体量 | 20~80μg/管 (推荐20μg) | 20~80μg/管 (推荐20μg) | 200~800μg/管 (推荐200μg) | - |
* 超滤管为一次性使用
** 不同规格按推荐抗体量标记效果最佳
标记步骤（适用于20~80μg抗体）
按照以下流程操作，可获得最佳标记效果：
抗体超滤浓缩换液
取20μg抗体（纯度>90%）加入超滤管，补满标记缓冲液 → 14000×g离心5分钟，弃滤液（重复1次去除杂质）→ 倒置滤芯，14000×g离心1分钟收集抗体 → 补标记缓冲液调至1 mg/mL
注：若抗体浓度>2 mg/mL且无杂质（如PBS缓冲），直接稀释至1 mg/mL
抗体修饰
按20μg抗体加0.5μL 抗体修饰试剂 → 混匀 → 37℃反应60分钟
HRP-抗体偶联
活化的HRP管加10μL标记缓冲液溶解 → 加入修饰后抗体溶液 → 37℃避光反应1.5小时（或4℃过夜）
封闭与纯化
300μg封闭试剂 + 30μL DMSO溶解 → 按20μg抗体加0.6μL封闭液 → 37℃避光反应30分钟 → 用50 KD超滤管，标记缓冲液超滤3~5次 → 回收纯化后的HRP标记物
保存
加HRP标记抗体保存液调浓度≥0.2 mg/mL → 4℃避光保存（勿冷冻！有效期≥6个月）
注意事项
- 关键操作：超滤步骤确保去除杂质（如甘油、叠氮钠）
- DMSO使用：有毒性，操作时戴手套
- 储存要求：避光保存标注"shading light"的组分
- 适用性：本试剂盒最适合IgG类抗体，特殊抗体（如IgM）需优化条件
