敲低稳转细胞系构建

敲低稳转细胞系构建

技术介绍

基因敲低(knock-down)一般是通过 shRNA、siRNA 或 CRISPRi 等技术持续降低目标基因的表达水平;基因敲低稳转细胞系的构建则是把这些干扰元件的表达盒子整合进细胞基因组,使其在细胞分裂后仍能遗传并长期表达,并通过抗性或荧光标记进行严格筛选,从而得到长期、可重复的基因沉默效果。

实验流程图

技术应用

敲低稳转细胞系的核心在于把 shRNA/CRISPRi 等基因沉默元件通过病毒或质粒整合进细胞基因组,并利用抗性筛选获得长期、可复制的基因表达抑制状态;该技术已广泛用于基因功能解析、药物靶点验证、疾病模型建立以及基因治疗的前期评估,是现代分子生物学和药物研发的重要工具。

服务流程

实验流程图

交付标准

  1. 构建好的细胞株一瓶或者2支冻存株(包含空载对照);
  2. 电子版构建报告(包括PCR验证及WB 全膜验证结果);
  3. 20 μL 验证使用的WB抗体。

备注:非编码基因不包含WB验证及抗体。

平台优势

  • 种子细胞优良:恩玑生命细胞平台所有的细胞,来源正规,人源细胞均可提供STR验证;
  • 产品质量保证:采用 RT-qPCR和WB 验证,保证表达水平;
  • WB全膜验证,不需要客户提供抗体;
  • 赠送WB验证抗体20 μL。

案例展示

案例展示内容

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