敲低稳转细胞系构建
Knock-down Stable Cell Line Construction
技术介绍
基因敲低（knock-down）一般是通过 shRNA、siRNA 或 CRISPRi 等技术持续降低目标基因的表达水平；基因敲低稳转细胞系的构建则是把这些干扰元件的表达盒子整合进细胞基因组，使其在细胞分裂后仍能遗传并长期表达，并通过抗性或荧光标记进行严格筛选，从而得到长期、可重复的基因沉默效果。
技术应用
敲低稳转细胞系的核心在于把 shRNA/CRISPRi 等基因沉默元件通过病毒或质粒整合进细胞基因组，并利用抗性筛选获得长期、可复制的基因表达抑制状态；该技术已广泛用于基因功能解析、药物靶点验证、疾病模型建立以及基因治疗的前期评估，是现代分子生物学和药物研发的重要工具。
服务流程
01
- 填写实验需求表
- 确定靶基因序列
- 确定细胞系名称
- 选择合适的启动子
- 选择合适的真核抗性
- 选择是否需要荧光标签或其他标签
02
- 生成订单
- 签订合同
- 生成订单
03
- 执行订单
- 设计干扰序列
- 构建载体
- 筛选有效片段
- 包装病毒
- 细胞抗性及MOI值筛选
- 多克隆或单克隆细胞筛选
- 基因表达验证
04
- 交付
- 和客户确认收货时间
- 发货并提供快递单号
- 邮箱发送电子版构建报告及验证报告
交付标准
- 构建好的细胞株一瓶或者2支冻存株（包含空载对照）
- 电子版构建报告（包括PCR验证及WB 全膜验证结果）
- 20 μL 验证使用的WB抗体
备注：非编码基因不包含WB验证及抗体。
平台优势
种子细胞优良
恩玑生命细胞平台所有的细胞，来源正规，人源细胞均可提供STR验证
产品质量保证
采用 RT-qPCR 和 WB 验证，保证敲低效率
WB 全膜验证
恩玑官网有的抗体可以不需要客户提供抗体
赠送WB验证抗体
20 μL（仅限恩玑官网上线的抗体）
案例展示
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