T 细胞活化的 “总开关”：ANO9 的免疫调控新机制

这篇发表于Cellular and Molecular Life Sciences（2026）的研究，系统阐明Anoctamin 9(ANO9，TMEM16J）通过调控Ca²⁺信号与PMCA 膜转运，控制 T 细胞活化，并揭示T604A/T595A 突变引发淋巴细胞过度活化，进而驱动慢性肾病（CKD）与过度炎症的全新机制。

一． ANO9靶点的分子生物学特性

ANO9（TMEM16J）：是一种跨膜蛋白，具有 Anoctamin 家族典型的拓扑结构，包含 8 个跨膜结构域。它主要定位于内质网（ER）和内质网 - 高尔基体中间体（ERGIC），这与其在膜蛋白运输和质量控制中的功能密切相关。

1. 离子通道与磷脂翻转活性：Anoctamin 家族的部分成员具有钙激活氯离子通道活性。虽然 Ano9 靶点 的具体离子通透性仍在深入研究中，部分研究提示其可能参与调节细胞膜电位或细胞内离子环境。此外，该家族成员具有磷脂翻转酶活性，Ano9 可能通过影响磷脂的不对称分布，进而调节细胞信号转导和膜动力学。

2. 囊泡运输调节因子：越来越多的证据表明，Ano9 在蛋白质的分泌途径中扮演着 “分子伴侣” 或调节者的角色。它可能协助某些膜蛋白（如离子通道和受体）从内质网向细胞膜转运，影响这些蛋白在细胞表面的表达丰度。

二．核心研究内容与发现

1. ANO9是T细胞活化的关键调节因子

研究发现，无论是在人Jurkat T细胞系还是原代人T细胞中，ANO9的缺失（通过敲除或敲低）都会导致T细胞受体（TCR）激活后的钙离子信号显著减弱，细胞增殖和白细胞介素-2（IL-2）的释放减少。具体来说，ANO9敲除（KO）的Jurkat细胞在CD3/CD28刺激下，胞内钙离子浓度的升高幅度明显低于野生型（WT）细胞。这种钙信号缺陷主要源于SOCE的受损。同样，在原代人T细胞中敲低ANO9，也抑制了CD3/CD28刺激引起的SOCE增强和IL-2 mRNA的表达。此外，一种潜在的ANO9抑制剂flunisolide能够有效抑制野生型Jurkat细胞的活化，进一步支持了ANO9的功能重要性。

ANO9-KO 人Jurkat T细胞 Ca²⁺ 信号受损

原代人 T 细胞中的验证

2.ANO9通过促进PMCA的膜转位来调控钙信号

文献提出了ANO9的作用机制：它通过促进PMCA在细胞活化时向质膜（特别是免疫突触处）的转位来发挥作用。PMCA负责将胞内钙离子泵出，维持钙微域的低钙环境，从而避免钙依赖性负反馈对钙释放激活钙通道（如Orai1）的抑制，确保持续、高效的钙内流。免疫荧光实验证实，在CD3刺激后，野生型Jurkat细胞膜上的PMCA信号显著增强，呈颗粒状分布，而这种增强在ANO9敲除细胞中大大减弱。此外，具有免疫调节功能的维生素D3（Vit-D3）能够上调活化T细胞中PMCA的膜表达，但这一效应在ANO9敲除细胞中消失，表明ANO9是Vit-D3发挥免疫调节作用的潜在介质。

ANO9通过促进PMCA的膜转位来调控钙信号

3. ANO9变异体T604A/T595A导致淋巴细胞过度活化

研究关注了一个与慢性肾病相关的ANO9人类变异体T604A（小鼠对应为T595A）。为了研究其功能，作者构建了T595A敲入（knockin）小鼠。与ANO9缺失导致的活性降低相反，T595A变异表现出功能获得（gain-of-function）效应。从这些小鼠分离的淋巴细胞表现出：

（1）在CD3/28激活过程中，小鼠原wt-Ano9和T595A-ANO9淋巴细胞中Ano9表达均上调。

（2）表达T595A-ANO9的淋巴细胞表现出增强的免疫活性。

（3）在CD3/28激活过程中，表达T595A-ANO9的淋巴细胞显示出更大的全细胞离子电流。

（4）增强的钙信号：CD3/CD28刺激后，胞内钙离子升高幅度更大，基础钙内流和SOCE均增强。

这些结果表明，T604A/T595A变异可能导致淋巴细胞过度活化，这为解释该变异如何通过促进炎症来引发慢性肾病提供了机制线索。

4. 人与小鼠淋巴细胞中ANO9表达的差异

研究指出，ANO9在人和小鼠淋巴细胞中的表达模式存在差异。在非活化状态下，小鼠淋巴细胞的Ano9表达水平远低于人淋巴细胞。然而，在CD3/CD28激活后，小鼠淋巴细胞的Ano9表达会被显著上调，而在人淋巴细胞中，ANO9的表达在活化过程中受到抑制。

三． 总结

本文通过基因敲除、siRNA 敲低、点突变敲入三种互补策略，系统阐明了：ANO9 是 T 淋巴细胞 Ca²⁺ 信号和免疫活化的关键调控因子。其缺失导致免疫缺陷，而疾病相关突变 T604A/T595A 导致淋巴细胞过度活化和炎症反应增强，这可能解释携带该突变患者发生慢性肾病和炎症性疾病的机制。

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参考文献

1. Schreiber R, et al. The scramblase anoctamin 9 controls the immune response in lymphocytes. Cell Mol Life Sci. 2026. [PMID: 41781734]

2. Schreiber R, et al. Anoctamin 9 determines Ca²⁺ signals during activation of T-lymphocytes. Front Immunol. 2025. [PMID: 40207216]