Q1:诱导2~3周无明显矿化是为什么?  

细胞代次过高或接种密度过低。建议使用代数<8的细胞,并在细胞汇合度达60%~70%时开始诱导。  

Q2:矿化弱怎么办?  

可能因诱导时间不足,可延长诱导时间至21~28天。  

Q3:诱导后期细胞成片脱落怎么办?  

1,用适量的1%明胶包被配用器皿;

2,诱导2周后,为尽量避免成骨细胞卷边、脱落,可将每3天全换液改为每2天半量换液,避免由于全部换液晃动带来的细胞漂浮,直至出现大量矿化结节。  

Q4:培养基出现白色沉淀还能用吗? 

白色沉淀可能是谷氨酰胺或钙盐低温结晶,37℃溶解后可正常使用;若出现大量浑浊且变色沉淀,则为污染或失效,需立即丢弃。  

Q5:诱导初期细胞大量死亡是为什么?  

可能因培养基未预热、pH异常,诱导培养基含对细胞有毒性的抗生素(低温下更易损伤细胞)。建议操作前将培养基37℃预热,并平衡至pH7.2~7.4。  

Q6:为什么茜素红加到孔板里有的是黄色,有的又是红色或紫色?  

茜素红在不同pH条件下会呈现不同颜色,通常在橙黄色至紫色范围内变化。我们成骨诱导培养基附赠的茜素红溶液pH为4.2,一般呈黄色或红色;染色时因环境变化、样本产生酸碱性物质,出现黄色、红色或紫色均属常见正常现象。



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