产品概述
EnkiLife Fluor488标记试剂盒包含标记抗体蛋白的多个组分，如高性能的Fluor488荧光染料、纯化用超滤离心管、洗脱标记缓冲液、标记蛋白保存液等，可轻松可靠地标记抗体、蛋白质和其他分子，以便用作荧光探针。
产品特点
- 快速：标记反应时间需约30分钟，同时兼顾标记效果和标记效率
- 简便：每只染料试剂已优化设计好对应的抗体量，无需繁琐计算，按照步骤操作即可获得良好效果
- 灵活：对大规格试剂盒中的染料进行分装，批次性能一致，方便多次使用
- 标记效果突出：优化的标记缓冲液使标记位点相对固定，增强标记后抗体的同质性
- 胺特异性标记：Fluor488上的活性基团能高效地结合抗体或其他纯化蛋白质上的伯胺基团，从而实现染料和抗体的共价标记结合
- 标记蛋白：主要针对IgG类抗体，和IgG抗体类似大小及性质的蛋白也可标记
染料简介
Fluor488是磺化后的罗丹明绿。通过引入两个磺酸根离子，Fluor488的水溶性大大增强，pH稳定性，光稳定性也提高。和荧光素类染料不同，Fluor488的荧光在较宽的pH范围内(4-10)保持不变。由于带多个负电荷，Fluor488不易分子间聚集，多个染料分子标记同一蛋白时，不易荧光自淬灭(self quenching)，或引起蛋白聚集。Fluor488是荧光素（FITC或FAM）的优异替代品，用于生物偶联物单分子检测、荧光相关光谱和荧光偏振测量表现极为突出。从各方面评价，Fluor488是目前极佳的水溶性小分子绿色荧光染料之一。
Fluor488染料性质
基本特性
类似染料：ATTO 488,Alexa Fluor® 488,Spark Blue™ 515,Cy®2,Cyanine2,DyLight® 488,FAM, FITC
常用激发光源：488 nm
最大激发波长：490 nm
最大发射波长：513 nm
摩尔消光系数：71000 L/(mol·cm)
量子产率：0.92
外观：桔色固体
Fluor488染料光谱图
试剂盒规格
| 产品组分 | 不同规格组分含量 | 储存温度 | ||
|---|---|---|---|---|
| 40μg抗体 | 200μg抗体 | 2mg抗体 | ||
| 活化的Fluor488 | 1管 | 5管 | 5管 | 开封后-20℃避光保存 |
| 50KDa超滤管* | 1 set** | 1 set** | 1 set** | RT |
| 标记缓冲液S | 10 mL | 10 mL | 10 mL | 2~8℃ |
| 1×PBS (pH 7.4) | 10 mL | 10 mL | 10 mL | 2~8℃ |
| DMF | 100 μL | 100 μL | 100 μL | 2~8℃, 避光 |
| 标记蛋白保存液 | 200 μL | 1 mL | 5 mL | 2~8℃ |
| 标记抗体量 | 每管染料可标记20~40μg抗体 推荐标记20μg抗体 | 每管染料可标记20~40μg抗体 推荐标记20μg抗体 | 每管染料可标记100~400μg抗体 推荐标记200μg抗体 | |
* 超滤管分子量截留值50KDa
** 1 set = 1个超滤管和收集管
标记原理
在一定的化学反应条件下，荧光染料活化基团专一性与抗体蛋白上的伯胺基反应，形成稳定的酰胺键，从而实现与抗体蛋白的标记偶联。
标记原理示意图
常规标记流程
- 1、超滤换液浓缩
- 2、标记反应
- 3、纯化
- 4、DOL计算，收集保存
标记流程图
其他问题
参见常见问题答疑
