总谷胱甘肽/氧化型谷胱甘肽活性测定试剂盒

总谷胱甘肽/氧化型谷胱甘肽活性测定试剂盒

规格:100T 价格:¥ 420
检测范围:1-50μM
灵敏度:0.1436μM
SKU: BC00026 Category: 比色法检测试剂盒 Tags:

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产品简介

谷胱甘肽是一种由3个氨基酸残基组成的小肽, 全称为谷氨酰-半胱氨酰-甘氨酸,英文名称为glutamyl-cysteinylglycine,简称glutathione。由于半胱氨酸上的巯基(SH)为谷胱甘肽的活性基团,所以常简写为G-SH或GSH。谷胱甘肽包括还原型谷胱甘肽(reduced glutathione, 常称为GSH)和氧化型谷胱甘肽(oxidized glutathione disulfide)两种形式。由于氧化型谷胱甘肽是由两个GSH通过巯基脱氢而成,所以常简写为G-S-S-G或GSSG。还原型谷胱甘肽是绝大多数活细胞中巯基的主要来源,对于维持蛋白质中巯基适当的氧化还原状态有重要作用,并且是动物细胞中关键的抗氧化剂。总谷胱甘肽中通常90-95%为还原型谷胱甘肽。

 

产品特点

★本试剂盒本试剂盒提供了蛋白去除试剂S,可以更加准确地测定出含有蛋白的样品中的总谷胱甘肽的量。本试剂盒的检测下限为1μM。标准品的实测效果参考下图:


检测原理     

谷胱甘肽还原酶可以还原氧化型谷胱甘肽(GSSG)生成还原型谷胱甘肽(GSH),而GSH可以和生色底物DTNB反应产生黄色的TNB和GSSG,并可以通过测定A412来检测TNB的生成量。适当设置应体系,前后两个反应合并起来后,总谷胱甘肽(GSSG+GSH)就相当于一个颜色产生的限速因素,总谷胱甘肽的量就决定了黄色的TNB形成量。从而通过测定A412就可以计算出总谷胱甘肽的量。本试剂盒的具体反应原理如下:


产品组分

编号

产品名称

包装规格(100T

保存方式

试剂一

总谷胱甘肽检测缓冲液

60ml

-20℃

试剂二

谷胱甘肽还原酶

150μl

-20℃

试剂三

还原型谷胱甘肽(GSH)

4.5mg

-20℃,配制成溶液,分装后-20ºC保存。

试剂四

DTNB

4.5mg

-20℃,配制成溶液,分装后-20ºC保存。

试剂五

蛋白去除试剂S

0.4g

-20℃,配制成溶液2-8ºC保存。

试剂六

NADPH

4mg

-20℃,NADPH溶解后分装并-70ºC保存,2-8ºC可以保存一天,-20℃保存一周后NADPH会降解10%以上。

试剂七

DMSO

1.5ml

-20℃

耗材一

96 孔酶标板

1 板

RT

耗材二

96 孔覆膜

2 张

RT

 

保存条件

未拆封的试剂盒可在 -20℃保存12个月。


注意事项

1. 本试剂盒检测时牵涉到氧化还原反应,所有氧化剂或还原剂都会干扰本试剂盒的测定。 特别是DTT、巯基乙醇等含有巯基的试剂会严重干扰本试剂盒的测定,请尽量避免。

2. 一定要严格控制反应时的温度和反应时间,否则需每次都做标准曲线。

3. NADPH等试剂不太稳定,要严格按照后续说明操作,谨防失活。

4. DMSO4ºC、冰浴等较低温度情况下会凝固,可以20-25ºC水浴温育片刻至全部融解后使用。

5. 本产品仅限于专业人员的科学研究用,不得用于临床诊断或治疗,不得用于食品或药品,不得存放于普通住宅内。




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