产品简介
乳酸脱氢酶活性测定试剂盒Lactate Dehydrogenase (LDH) Activity Assay Kit,也称乳酸脱氢酶细胞毒性检测试剂盒(LDH Cytotoxicity Assay Kit)或乳酸脱氢酶释放检测试剂盒(LDH Release Assay Kit)。细胞凋亡或坏死而造成的细胞膜结构的破坏会导致细胞浆内的酶释放到培养液里,其中包括酶活性较为稳定的LDH。通过检测从质膜破裂的细胞中释放到培养液中的LDH的活性,就可以实现对细胞毒性的定量分析。LDH释放被看作细胞膜完整性的重要指标,并被广泛用于细胞毒性检测。
产品特点
可检测的样本类型丰富:本试剂盒可检测细胞培养液、细胞裂解液等样品中乳酸脱氢酶的活性,也常用于以LDH释放为指标的细胞毒性检测;同时,基于细胞总乳酸脱氢酶活性的检测,本试剂盒也可以用于检测细胞增殖和细胞毒性检测。
检测原理
在乳酸脱氢酶的作用下,NAD+被还原生成NADH,NADH和INT(2-p-iodophenyl-3-
nitrophenyl tetrazolium chloride)被硫辛酰胺脱氢酶(diaphorase)催化反应生成NAD+和强生色物甲臜(formazan),在490nm波长下产生吸收峰,从而可以通过比色来定量乳酸脱氢酶的活性。吸光度与乳酸脱氢酶活性成线性正相关。该酶联反应原理的示意图如下:

产品组分
产品名称 | 包装规格(100T) | 包装规格(500T) | 保存方式 |
LDH释放试剂 | 1.5ml | 7.5ml | -20℃ |
乳酸溶液 | 1ml/支,两支 | 10ml | -20℃ |
酶溶液 | 1ml/支,两支 | 10ml | -20℃,需注意避免反复冻融。 |
INT溶液(10×) | 0.2ml | 0.2ml | -20℃,需避光保存。 |
INT稀释液 | 1ml/支,两支 | 1ml/支,两支 | -20℃ |
96 孔酶标板 | 1 板 | 5 板 | RT |
96 孔覆膜 | 2 张 | 10 张 | RT |
保存条件
未拆封的试剂盒可在 -20℃保存12个月。试剂盒解冻后可以短期2-8ºC存放,2-3天内有效。
注意事项
1. 冷冻会使样品中部分乳酸脱氢酶失活,4ºC可放置2-3天。建议样品准备好后尽量当天完成测定。
2. 如果检测细胞培养液中的乳酸脱氢酶,由于血清含有乳酸脱氢酶,建议血清的使用浓度不要超过1%,并最好使用热灭活血清。如果一定需要使用10%血清,在检测时一定要设置没有细胞,但加入了相同体积培养液的对照孔,以用于消除背景。
3. 细胞过度生长、密度过高、离心速度过大、培养箱内外温差过大,都会造成细胞释放乳酸脱氢酶增加。
4. 如果希望进行乳酸脱氢酶活性的绝对定量,用户需自备乳酸脱氢酶标准品。
5. 本产品仅限于专业人员的科学研究用,不得用于临床诊断或治疗,不得用于食品或药品,不得存放于普通住宅内。