产品简介
谷胱甘肽过氧化物酶检测试剂盒(NADPH法)是一种常用的生化试剂盒，用于检测谷胱甘肽过氧化物酶（GPx）的活性。GPx是一种重要的抗氧化酶，能够清除人体内的过氧化氢等有害物质，在保护细胞免受自由基损伤，维护细胞内环境的稳定性。细胞内的脂类容易和自由基发生反应，产生脂类过氧化物。谷胱甘肽过氧化物酶可以利用还原型谷胱甘肽(GSH)还原脂类过氧化物，从而消除自由基的毒害作用。谷胱甘肽过氧化物酶几乎在所有组织中都有分布。在一些病理状况下谷胱甘肽过氧化物酶的活力会发生明显上调或下调。
产品特点
★ 本试剂盒提供的有机过氧化物试剂（t-Bu-OOH）在没有谷胱甘肽过氧化物酶存在的情况下不会和GSH产生反应，也不会被细胞内的过氧化氢酶催化而分解。因而可以较为特异地检测出谷胱甘肽过氧化物酶的活力。
★ 由于t-Bu-OOH不能被不含硒的谷胱甘肽过氧化物酶所催化，所以本试剂盒可以比较特异地定量检测最常见的含硒的谷胱甘肽过氧化物酶。
检测原理
GPx催化还原型谷胱甘肽（GSH）与过氧化物试剂（R-OOH）反应，转化为氧化型谷胱甘肽（GSSG）。谷胱甘肽还原酶（GR）可以利用NADPH催化GSSG产生GSH。在上述反应中，谷胱甘肽过氧化物酶是整个反应体系的限速步骤，因此NADPH的减少量和谷胱甘肽过氧化物酶的活力线性相关。因此通过检测A340的变化，反应NADPH减少的量，即可计算GPx的活力水平。
产品组分
产品名称 | 包装规格（100T） | 保存方式 |
样品匀浆液 | 100ml | -20℃ |
谷胱甘肽过氧化物酶检测缓冲液 | 50ml | -20℃ |
谷胱甘肽还原酶 | 100μl | -20℃ |
NADPH | 11.5mg | -20℃，NADPH溶解后，分装-70ºC保存，4ºC可以保存一天，-20ºC保存一周后NADPH会降解10%以上 |
还原型谷胱甘肽(GSH) | 10mg | -20℃，GSH配制成溶液，分装后-20ºC保存 |
过氧化物试剂(t-Bu-OOH) | 200μl | -20℃ |
96 孔酶标板 | 1 板 | RT |
96 孔覆膜 | 2 张 | RT |
保存条件
未拆封的试剂盒可在 -20℃保存12个月。
注意事项
1. 本试剂盒检测时涉及氧化还原反应，因此所有氧化剂或还原剂都会干扰本试剂盒的测定。如果在样品中的还原剂无法避免，例如DTT、巯基乙醇等，则这些还原剂的总浓度至少低于0.1mM。 0.15mM的DTT可以抑制40%的酶活力。
2. 常用的Triton X-100、 Tween-20等去垢剂都含有较高水平的过氧化物，会影响本试剂盒的测定。如果必须使用这些去垢剂，最好使用纯度较高并注明含较低过氧化物的去垢剂。
3. 加入过氧化物试剂溶液后的第一次读数，例如0分钟时A340读值不宜低于1。如果读数低于1，说明样品中的GPx活力太高，或者样品中本身的GSSG含量太高，需要将样品适当稀释或者减少样品的用量，否则反应很快就进入平台期，无法获取正常的检测数据。 样品可以立即测定，也可以-70ºC冻存待以后测定。
4. 一定要严格控制反应时的温度为25ºC，否则会引起较多误差。
5. NADPH不太稳定，要严格按照后续说明操作，谨防失活。
6. 本产品仅限于专业人员的科学研究用，不得用于临床诊断或治疗，不得用于食品或药品，不得存放于普通住宅内。
