FAQ｜实验操作
1. 操作流程
问：可以更改孵育时间、孵育温度吗?
答：不建议更改孵育时间和温度，EnkiLife每个试剂盒都经过了精细的调试，确保在规定的孵育时间和温度下，试剂盒性能符合质量控制要求。若孵育时间和温度被更改，我们无法保证试剂盒的性能，进行无法保证检测结果的准确性。
2. 上样量调整
问：样本或试剂不足时，可以统一减少上样体积吗？
答： 不建议统一减少上样体积，样本或试剂上样体积的任何调整都可能改变实验体系，进而影响检测结果。因此，ELISA实验的每一步都必须严格按照说明书规定的上样体积操作，以确保实验的准确性。
若您的样本体积不足，请与我们联系，以确定是否可以对样本进行稀释。若试剂体积不足，建议根据实际情况减少待测孔数，不可将试剂稀释后检测。
3. 阳性/阴性对照
问：如何设置ELISA实验的阳性或阴性对照？
答： 阳性对照通常使用标准品，阴性对照通常使用样本稀释液，也可使用与待检物具有同源性和同质性的空白基质或已知低浓度的基质溶液。
4. 预实验
问：为什么建议进行预实验？如何进行？
答： 预实验的目的：确定样本是否需要稀释及合适的稀释倍数；确保试剂盒与您的样本类型兼容，避免资源浪费；帮助您熟悉操作流程，特别是对于初次使用或更换品牌的用户。
操作步骤简述：在正式实验前，选取2-3个差异显著的样本进行系列稀释，依照说明书操作，然后根据预实验结果和试剂盒检测范围确定最佳稀释倍数。
5. 标曲孔数
问：待检测样品较多时，可以减少标曲的孔数吗？
答： 不建议减少标曲的孔数，为确保结果准确，建议至少检测6个不同浓度的标准品。
6. 复孔
问：ELISA实验是否需要设置技术重复？
答： 为保证实验结果的准确性，建议标准品和样品都做复孔检测。但并非一定要求做复孔或3复孔，客户可根据实际情况调整。
7. 产品组分混用
问：试剂盒内或不同批次间的组分可以混用吗？
答： 不建议混用，每个批次的试剂盒都经过了精细的调试，确保各组分之间的协同作用，以实现最佳的实验效果。试剂盒组分若被更换，我们无法保证试剂盒的性能。
8. 液态标准品
问：试剂盒中的标准品稀释后还能再次使用吗？
答： 标准品溶解后，由冻干粉变为液态形式，且由于浓度降低，导致稳定性降低，因此不宜在室温下长时间存放。建议客户在需要进行多次实验时，将新溶解的标准品分装，1支用于本次试验，其余立即冷冻于-20℃，并在两周内使用。
9. 稀释液替换
问：可以用生理盐水或PBS替代样本稀释液吗？
答： 不建议直接用生理盐水或PBS替代，这两种溶剂跟试剂盒体系不能完全兼容，影响检测结果的精确性。
10. 样本稀释
问：稀释方案
答：样本稀释建议遵循以下指南：
100倍稀释：将5μl样本加入495μl稀释液中。
1000倍稀释：先20倍稀释：将5μl样本加入95μl稀释液；再50倍稀释：将5μl 20倍稀释样本加入245μl稀释液中，实现1000倍稀释。
100000倍稀释：先40倍稀释：5μl样本加入195μl稀释液；再50倍稀释：将5μl 40倍稀释样本加入245μl稀释液中；最后50倍稀释：将5μl 2000倍稀释样本加入245μl稀释液中，实现100000倍稀释。
每次稀释后需充分混匀，避免气泡产生，且每步稀释时取液量不少于3μl，不超过100倍。
11. 波长校正
问：ELISA读值时必须进行波长校正吗？
答： 双波长测量的目的是为了校正由酶标板及其他非特异性物质引起的吸光度干扰。鉴于我们提供的酶标板均经过精心筛选，具有极低的背景值，若您的检测设备不支持双波长设置，您可以直接采用推荐的单一波长进行检测，无需进行额外的校正。