胰酶细胞消化液(2.5%胰酶,含EDTA,不含酚红)

胰酶细胞消化液(2.5%胰酶,含EDTA,不含酚红)

规格:100 mL/500 mL      价格:详询

SKU: RC0171 Category: 缓冲液和消化液 Tags:

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产品简介

在组织细胞的体外培养和原代细胞培养中的组织细胞分散(将组织块制备成单个细胞悬液) 以及传代细胞培养中,贴壁生长细胞的消化分散均要使用组织细胞消化液。常用的消化液为胰蛋白酶,EDTA等,其功能主要是使细胞间的蛋白质(如细胞外基质)水解,使组织或贴壁细胞分散成单个细胞,制成细胞悬液用于进一步的实验。

胰蛋白酶-EDTA消化液(Trypsin-EDTA Solution)2.5%胰酶0.2% EDTA5.3 mM),溶于无钙镁平衡盐溶液中,经过滤除菌,可以直接用于培养细胞和组织的消化。本产品具有方便快速、稳定安全、细胞状态好等特点。通常室温消化2分钟左右就可以消化下大多数贴壁细胞。

浓度

10×

胰酶

2.5%

EDTA5.3mM

0.2%

酚红指示剂

 

使用方法

1、贴壁细胞的消化:

 a) 吸去培养液,用无菌的 PBSHanks 液或无血清培养液洗涤细胞一次,以去除残余的血清。

 b) 加入少量胰蛋白酶-EDTA 消化液,盖过细胞即可,室温放置 1-2 分钟。不同的细胞消化时间有所不同,对于贴壁牢固的细胞可适当延长消化时间。

 c) 显微镜下观察,细胞明显收缩,并且肉眼观察培养器皿底部发现细胞的形态发生明显的变化;或者用枪吹打细胞发现细胞刚好可以被吹打下来。此时吸除消化液。加入含血清的细胞培养液,吹打下细胞,即可直接用于后续实验。

d) 如果发现消化不足,可加入胰蛋白酶-EDTA 消化液重新消化。

e) 如果发现细胞消化时间过长,未及吹打细胞,细胞已经有部分直接从培养器皿底部脱落, 直接用胰酶细胞培养液把细胞全部吹打下来。1000-2000g 离心 1 分钟,沉淀细胞,尽量去除胰酶细胞消化液后,加入含血清的完全培养液重新悬浮细胞,即可用于后续实验。

2、组织的消化:不同的组织需要消化的时间相差很大,通常以消化后可以充分打散组织为宜。

 

注意事项

1. 由于组织或细胞性质不同,实验人员应依据具体情况,确定最佳消化时间;消化细胞间不宜过长,否则会影响细胞贴壁和生长状况;

2. 本产品不含抑菌剂,在使用过程中要特别注意无菌操作,避免消化液被微生物污染;

3. 不宜4℃长期保存,切忌反复冻融,小量使用时建议分装冻存;

4. 为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作;

5. 本产品仅用于科研或进一步研究使用,不用于诊断和治疗。




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