技术指南|细胞培养之细胞传代篇


1. 细胞的接种密度一般为多少?

依照细胞株基本数据上的接种密度或稀释分盘比例接种即可。细胞数太少或稀释的太多也是是造成细胞无法生长的重要原因之一。 

 

2. 二价离子抑制trypsin活性吗?使用trypsin时加入EDTA的目的和注意事项 

二价离子会抑制trypsin活性。EDTA主要用来螯合游离的镁离子和钙离子,以便保持trypsin的活性。建议trypsin处理细胞前,用EDTA清洗细胞,以消除来自培养基中的二价离子。第一次开瓶后应立即少量分装于无菌试管中,保存于–20 C,避免反复冻融造成trypsin活性降低,并可减少污染风险。

 

3 悬浮细胞应如何传代处理?

一般仅需持续加入新鲜培养基于原培养瓶中,稀释细胞浓度即可。如果培养液太多,可将培养瓶口端稍微抬高,直到无法容纳为止。分瓶时取出一部份含细胞的培养液至另一新的培养瓶,加入新鲜培养基稀释至适当浓度,重复前述步骤即可。



Leo 

Dylan Z是EnkiLife的蛋白抗体研发专家,精通蛋白表达系统和抗体制备技术,在技术上精益求精,致力于为用户开发稳定好用的产品。



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