产品介绍
细胞发生凋亡时,会激活一些 DNA 内切酶,这些内切酶会切断核小 体间的基因组DNA,产生 180 bp-200 bp 的 DNA 片段,表现为琼脂糖凝胶电泳中呈现的特异的梯状 Ladder 图谱。基因组 DNA 双链或单链 断裂时会出现产生大量的粘性 3'-OH 末端,可在脱氧核糖核苷酸末端转移酶(TdT)的催化作用下,与 dUTP 结合,从而通过荧光显微镜 或流式细胞仪直接进行凋亡细胞的检测,这类方法称为脱氧核糖核苷酸 末端转移酶介导的缺口末端标记法( Terminal - deoxynucleotidyl transferase mediated nick end labeling, TUNEL)。由于正常的或正 在增殖的细胞几乎没有 DNA 的断裂,因而没有 3'-OH 形成,很少能够被染色。Tunel 法可以对完整的单个凋亡细胞核或凋亡小体进行原位染 色,能准确地反应细胞凋亡典型的生物化学和形态特征,可检测出极少量的凋亡细胞,因而在细胞凋亡的研究中广泛采用。
本试剂盒应用范围广,可用于检测冷冻或石蜡切片中的细胞凋亡情况,也可检测培养的贴壁细胞或悬浮细胞的凋亡情况。可选择性的检测凋亡细胞,而非坏死细胞或因辐照和药物治疗而造成的 DNA 链断裂的细胞。本试剂盒检测细胞凋亡,耗时短,只需一步染色反应,洗涤后即可检测。
基本信息
中文名称 | 一步法通用型TUNEL细胞凋亡试剂盒(Fluorescein 488,绿色) |
英文名称 | One-Step Universal TUNEL Apoptosis Kits(Fluorescein 488, Green) |
产品规格 | 20 T、50 T |
存储条件 | -20℃,避光保存 |
运输条件 | 冰袋运输 |
有效期 | 12个月 |
激发/发射波长 | 490/515 nm |
产品组分
组分 | 20 T | 50 T |
A. 488 TUNEL Reaction Buffer | 1 mL | 2×1.25 mL |
B. TdT Enzyme | 40 μL | 100 μL |
C. Proteinase K (2 mg/mL) | 40 μL | 100 μL |
D. DNase I (2 U/μL) | 5 μL | 13 μL |
E. 10 × DNase I Buffer | 100 μL | 260 μL |
注:组分 A 需避光,避免反复冻融
注意事项
1. 使用前请将产品瞬时离心至管底,再进行后续实验。
2. 染色背景较重或非特异性着色明显时可适当减少染色时间。
3. 实验时建议增加阴性对照和阳性对照组。
4. 组分 A 使用时请佩戴口罩、手套,如接触皮肤,请立即用大量水冲洗。
5. 荧光染料均存在淬灭问题,请尽量注意避光,以减缓荧光淬灭。
6. 本产品仅限于科研,不得用于临床诊断或治疗。
7. 为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。
备注:该试剂仅供科研使用!