人畸胎癌细胞系NCCIT
一. 细胞起源
NCCIT细胞系源于人类纵隔非精原细胞瘤（NSGCT），具有精原瘤与胚胎癌的混合特征，被认为是恶性的人类早期胚胎细胞（如卵裂期胚胎）的肿瘤化模型[1][2]。其多能性表明其可能代表生殖细胞肿瘤中精原瘤向胚胎癌转化的中间状态[1]。
二. 生物学特性
1. 形态与结构
干细胞呈圆形，核质比高，胞质内细胞器稀少（仅含游离核糖体和少量线粒体），缺乏桥粒和钙黏蛋白连接[1]。
超二倍体核型（54-64条染色体），伴显著结构畸变（如染色体缺失、等臂染色体）[1]。
2. 表面标志物
共表达多能性糖脂抗原：SSEA-1、SSEA-3、SSEA-4、TRA-1-60、TRA-1-81[1]。
高表达碱性磷酸酶（胎盘型及肝/骨/肾型异构酶）[1]。
3. 分泌蛋白
分泌人绒毛膜促性腺激素（hCG）和甲胎蛋白（AFP），提示其分化为滋养层细胞和卵黄囊样细胞的能力[1]。
4. 分化潜能
发育多能性：可向三胚层（外胚层、中胚层、内胚层）及胚外组织（如滋养层）分化[1][2]。
视黄酸诱导后分化为角蛋白、胶质纤维酸性蛋白（GFAP）、神经丝蛋白阳性细胞[1]。
三. 培养与储存
1. 培养条件：常规组织培养体系（如DMEM+胎牛血清），37℃、5% CO₂环境[1]。
2. 冻存方法：含10% DMSO的冻存液，液氮长期保存，复苏存活率>80%[1]。
四. 研究应用领域
1. 发育生物学模型：研究早期胚胎分化、多能性维持机制[1][4]。
2. 抗癌药物筛选平台：如铁皮石斛多糖通过抑制增殖验证其抗癌活性[6][15]。
3. 细胞重编程工具：NCCIT细胞提取物可诱导293T细胞去分化并获多能性[4]。
五. 近几年研究进展
1. 表观遗传调控
NCCIT中OCT4、SOX2启动子区低甲基化，H3K4me3和H3K27ac富集模式区别于精原瘤细胞系TCam-2[16]。
2. 关键基因功能H19长链非编码RNA：下调后抑制细胞增殖（S期减少、G0/G1期阻滞）并降低存活率[19]。
EMC3基因：过表达加剧内质网应激（GRP78、CHOP上调），显著抑制细胞存活[20]。
3. 天然产物干预
铁皮石斛多糖：有效抑制NCCIT增殖（IC₅₀为200–400 μg/mL），机制与细胞周期阻滞相关[6][15]。
六. 局限性与克服方法
局限性 | 克服策略 |
染色体不稳定性影响实验可重复性 | 单细胞克隆筛选稳定亚系[1] |
体外分化方向不可控 | 优化诱导方案（如梯度视黄酸处理）[4] |
肿瘤源性限制临床转化 | 联合基因编辑技术构建安全亚型[4] |
七. 总结与展望
NCCIT作为多能性生殖细胞肿瘤模型，在胚胎发育、抗癌机制和重编程研究中不可替代。
未来方向：
1. 结合单细胞测序解析其异质性；
2. 开发EMC3-H19通路靶向疗法；
3. 探索天然产物协同抗癌机制[6][20]。
参考文献
1. Retinoic acid-induced differentiation of the developmentally pluripotent human germ cell tumor-derived cell line, NCCIT. Damjanov I, et al. Lab Invest. 1993;68(2):220-232.[PMID: 8423617]
2. Four new human germ cell tumor cell lines. Teshima S, et al. Jpn J Cancer Res. 1988;79(9):999-1003.[PMID: 3142911]
3. Induction of dedifferentiation, genomewide transcriptional programming, and epigenetic reprogramming by extracts of carcinoma and embryonic stem cells. Taranger CK, et al. Mol Biol Cell. 2005;16(12):5719-5735.[PMID: 16195354]
4. 刘亚娟. 铁皮石斛多糖对小鼠胚胎干细胞生长的影响及抗癌免疫活性研究[D].浙江理工大学, 2017.
5. 刘亚娟,等. 铁皮石斛多糖抗癌及免疫活性研究.中国中药杂志. 2014;39(10):1882-1887.
6. Seminoma and Embryonal Carcinoma Footprints Identified by Analysis of Integrated Genome-Wide Epigenetic and Expression Profiles of Germ Cell Cancer Cell Lines. van der Zwan YG, et al. PLoS One. 2014;9(6):e98330.[PMID: 24893149]
7. The knockdown of H19lncRNA reveals its regulatory role in pluripotency and tumorigenesis of human embryonic carcinoma cells. Zeira E, et al. Oncotarget. 2015;6(33):34691-34704.[PMID: 26416453]
8. 高爽,等. 内质网膜复合亚基3调控内质网应激影响人畸胎瘤细胞的存活. 畜牧兽医学报. 2021;52(3):786-792.[PMID: 33658127]