巯基乙醇在细胞培养中的应用：关键还原剂的科学解析
在细胞培养技术中，维持细胞活性与功能依赖于精细调控的微环境。巯基乙醇（β-Mercaptoethanol, 2-ME或β-ME）作为一种关键的培养基添加剂，通过其独特的还原特性，成为提升难养细胞存活率、支持高密度培养的核心工具。
一、核心功能机制：还原微环境的构建者
（1）清除氧自由基（ROS）：中和过氧化氢（H₂O₂）、超氧阴离子等代谢毒性产物，防止脂质、蛋白质及DNA氧化损伤，降低细胞凋亡率。
（2）维持谷胱甘肽（GSH）稳态：作为外源还原剂，跨膜进入细胞后参与GSH再生循环，增强内源性抗氧化系统功能。
二、典型应用场景：敏感细胞的“生长引擎”
巯基乙醇对特定细胞类型具有不可替代的促进作用，尤其适用于以下场景：
（1）免疫细胞培养： B/T淋巴细胞：增强分裂原反应，促进抗体分泌，如添加50 μM 巯基乙醇可使淋巴细胞凋亡率降低40–60%，显著提升细胞密度与活力，其他免疫细胞的培养，通常也需要额外添加一定浓度的巯基乙醇，如NK细胞（Enkilife货号CXH00406）
（2）杂交瘤细胞：减少细胞团聚集，提升单克隆抗体产量
（3）干细胞与难养细胞： 如胚胎干细胞（ESC），抑制ROS诱导的分化信号，维持多能性；原代神经元/上皮细胞：延长体外存活时间
（4）转化研究工具：诱导骨髓间充质干细胞（BMSCs）定向分化为神经样细胞，用于组织工程。
三、使用要点
（1）浓度适配：根据细胞类型调整终浓度，如Thp-1细胞（Enkilife货号CXH00098）需0.05 mM。
（2）稳定性： 溶液易氧化，需避光保存，配制后24小时内使用。 长期培养建议每日补充（或选用稳定性更高的DTT替代）。
（3）毒性控制：浓度＞100 μM可能诱发线粒体毒性，需通过MTT/CCK-8实验优化。
（4）血清依赖性：在无血清培养基中作用更显著，因其缺乏天然抗氧化成分。
参考文献
1. Ramada R Khaswaneh, Ejlal Abu-El-Rub，et al (2024) Comparing the effect of using 2-Mercaptoethanol in the cell culture medium of different cell passages of human mesenchymal stem cells. Cell. Mol. Biol. (ISSN: 1165-158X). http://dx.doi.org/10.14715/cmb/2024.70.4.6
2. Mushahary D, Spittler A, Kasper C, et al (2018) Isolation, cultivation, and characterization of human mesenchymal stem cells. Cytometry A 93:19–31. https://doi.org/10.1002/cyto.a.23242
3.Panahi M, Rahimi B, Rahimi G, et al (2020) Cytoprotective effects of antioxidant supplementation on mesenchymal stem cell therapy. J Cell Physiol 235:6462–6495. https://doi.org/10.1002/jcp.29660
4.Ishii K, Katayama M, Hori K, et al (1993) Effects of 2-mercaptoethanol on survival and differentiation of fetal mouse brain neurons cultured in vitro. Neurosci Lett 163:159–162. https://doi.org/10.1016/0304-3940(93)90371-Q
5.Sugama K, Namba Y, Hatanaka M, Hanaoka M (1987) 2-Mercaptoethanol Acts as a Potentiating Factor of Interleukin-2-Dependent Lymphocyte Proliferation. Microbiol Immunol 31:691–700. https://doi.org/10.1111/j.1348-0421.1987.tb03130.x
6.Chang M-P, Strehler BL, Makinodan T (1982) Requirement of 2-mercaptoethanol for in vitro growth factor production by T cells and vulnerability of the response to age. Mech Ageing Dev 20:65–73. https://doi.org/10.1016/0047-6374(82)90075-6
7.Khang G, Kim HL, Hong M, Lee D (2012) Neurogenesis of bone marrow-derived mesenchymal stem cells onto β-mercaptoethanolloaded PLGA film. Cell Tissue Res 347:713–724. https://doi.org/10.1007/s00441-011-1232-4
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