细胞鉴定（STR）相关问题解答
Q1：小鼠细胞STR匹配到其他细胞系，一定是错误细胞吗？
（1）有公开数据库数据：若匹配失败（相似度<80%），可判定为错误细胞系
（2）无公开数据：小鼠多为近交系（遗传背景高度相似），同品系细胞易相互匹配，需结合细胞形态、功能实验、特异性标记物（如流式检测CD抗原）综合验证
Q2：无STR位点信息的细胞如何鉴定？
A2：三步验证法：
形态学检查：显微观察生长特性与典型形态
种属鉴定：人/鼠细胞 → 用COI基因条形码测序（Cytochrome c oxidase subunit I）
其他物种 → 16S rRNA或ITS序列分析
功能标志物检测：免疫荧光/流式检测组织特异性蛋白（如神经元细胞测β-tubulin III）
分化潜能实验（干细胞）
Q3：原代细胞需要做鉴定吗？
A3：通常不需要。由于原代细胞传代次数较少，一般不会选择STR鉴定进行溯源。且来源于同一个体的杂细胞也无法通过STR鉴定来区分。因此鉴定原代细胞正确性和纯度常选择免疫荧光、流式等方法检测特异性marker。
Q4：做STR可以判断种属的交叉吗？
A4：能力有限，需结合其他技术
（1）若人源细胞混入大量异种细胞，峰图呈锯齿状杂峰，可直接判读
（2）若人源细胞混入微量异种细胞 ，通常不可见，需通过COI种属鉴定 + qPCR物种特异性基因辅助判定
（3）若小鼠细胞混入人源细胞，可检出AMEL等位基因异常，可直接判读
（4）若小鼠混入非人异种细胞，仅当污染量>15%时可能被发现，需要线粒体基因测序等辅助手段
Q5：为什么有的小鼠细胞做了STR鉴定，但却说只能鉴定出种属？
A5：这些小鼠细胞系的位点信息还未录入数据库，没有可以比对的数据，所以检测结果不能确定是哪个小鼠细胞系。虽然这些细胞经过小鼠STR基因检测，确实测出了位点数据，只能说明该细胞是小鼠细胞，并且没有掺杂人的细胞，STR鉴定只能起到确定种属的作用。
Q6：数据库中没有位点信息的细胞系可以做STR鉴定吗？做了有什么意义？
A6：人、小鼠细胞可以做。其他物种的STR基因在开发中。没有位点信息的细胞系做STR仍然是有意义的：
（1） STR检测可以起到鉴定种属正确性的作用。
（2）首次引入细胞时检测的STR位点信息可以作为今后的参考：在细胞长期培养后若发现细胞特性改变，可重新检测STR基因，与首次引入时检测的数据对比。
Q7：什么时候需要做STR鉴定？
A7：以下情况建议做STR鉴定
（1）当实验室引入新的细胞株，而供者未提供相关鉴定。
（2）当细胞经过较长时间培养，发现细胞形态、功能等特性发生较大改变。
（3）当怀疑实验室保藏细胞时发生错误标记时。
Q8：同一种细胞在不同细胞库的位点信息怎么不一样？
A8：细胞在漫长的传代过程中可能发生基因突变，因此不同实验室保存的细胞具体位点可能略有差异；另外，即使是同一个细胞库保存的细胞，在不同检测环境下也可能会有部分位点差异。所以包括ATCC、DSMZ、ECACC在内的大型细胞库，相同的细胞都可能会有位点差异。根据国际细胞鉴定委员会（ICLAC）制定的细胞STR鉴定标准，细胞系的匹配度≥80%时，认为它们具有相关性，即衍生于共同的祖先细胞。
 | Dylan Z Dylan Z是EnkiLife的蛋白抗体研发专家，精通蛋白表达系统和抗体制备技术，在技术上精益求精，致力于为用户开发稳定好用的产品。 |