产品概述
EnkiLife PE-Cy7标记试剂盒包含标记抗体蛋白的多个组分，如优选的已经活化冻干的 PE-Cy7荧光染料、纯化用超滤离心管、标记缓冲液等、标记化学试剂、标记蛋白保存液等，可轻松可靠地标记抗体，以便用作荧光探针。
产品特点
- 定向偶联：优化的定向偶联技术，标记抗体的均一性较好，且提高了标记结合效率。
- 快速：步骤简单，最快3~4h即可高效完成标记。
- 简便：每只染料试剂已优化设计好对应的抗体量，无需繁琐计算，抗体样本符合标记条件情况下无需超滤，按照步骤混合相应试剂，进行简单操作可得到较好效果。
- 灵活：对大规格试剂盒中的染料进行分装，固体染料形式批次稳定性能一致，方便多次使用。
- 标记效果突出：活化染料具备加长臂，有效避免抗体和荧光染料间的空间位阻，保护抗体活性的同时，获得更高标记效率。
- 高性能荧光染料：优选的高性能荧光染料，量子产率高，荧光亮度大，能有效提高检测灵敏度，且化学性质较为稳定，能适应后续多种应用场景，如固定细胞样本的检测。
- 实验试剂全覆盖：配备标记保存液，从标记到保存全流程无需额外配备试剂，一个盒子搞定全部标记过程，省心，省事。
染料简介
PE-Cy7是一种基于荧光共振能量转移（FRET）原理制备的串联复合荧光染料，由R-PE和Cy7结合而成，在此复合染料中，激发能量可从PE传递到Cy7上，最大发射波长为780 nm。PE-Cy7与FITC无光谱重叠，与APC重叠也较少，因此可与FITC、PE、APC搭配使用。在实验中需要注意，PE-Cy7相对容易发生光淬灭，使用时需要严格避光环境。
PE-Cy7染料性质
基本特性
类似染料：PE-F750,PE-Vio770
常用激发光源：488nm
最大激发波长：496 nm，565 nm
最大发射波长：780 nm
外观：冻干的紫红色固体
PE-Cy7染料光谱图
试剂盒规格
| 产品组分 | 不同规格组分含量 | 储存温度 | ||
|---|---|---|---|---|
| 40μg抗体 | 200μg抗体 | 1mg抗体 | ||
| 活化的PE-Cy7 | 1管 | 1管 | 5管 | -20℃, shading light |
| 50KDa超滤管* | 1 set** | 1 set** | 1 set** | RT |
| 标记缓冲液L | 2 mL | 2 mL | 2 mL | 2~8℃ |
| 抗体修饰试剂 | 60 μL | 60 μL | 60 μL | -20℃, shading light |
| 封闭试剂 | 300 μg | 300 μg | 300 μg | -20℃, shading light |
| DMSO(溶解封闭试剂) | 50 μL | 50 μL | 50 μL | -20℃, shading light |
| 标记蛋白保存液 | 200 μL | 1 mL | 5 mL | 2~8℃ |
| 标记抗体量 | 每管染料可标记20~40μg抗体 推荐标记20μg抗体 |
每管染料可标记50~200μg抗体 推荐标记100μg抗体 |
每管染料可标记50~200μg抗体 推荐标记100μg抗体 |
|
* 超滤管分子量截留值50KDa
** 1 set = 1个超滤管和收集管
标记原理
在一定的化学反应条件下，荧光染料活化基团专一性与化学修饰后的抗体蛋白特定氨基酸残基反应，从而实现与抗体蛋白的定点偶联。
标记原理示意图
常规标记流程
- 1、抗体超滤换液浓缩（可选）
- 2、抗体活化修饰
- 3、标记反应
- 4、封闭保存
标记流程图
其他问题
参见常见问题答疑
