His-Tag快速检测卡（竞争法）高敏版
His标签蛋白高灵敏度检测 · 15分钟出结果 · 乳胶微球标记
产品概述
His-Tag快速检测卡（竞争法）高敏版采用乳胶微球标记的免疫层析技术，基于竞争免疫检测原理开发而成。本试剂使用高灵敏度的红色乳胶微球作为标记物，具有显色更清晰、背景更低的优点。检测卡的层析膜上固定有His-Tag重组蛋白作为检测线，以及DNP-BSA作为质控线；金标垫上则包被了乳胶微球标记的抗His-Tag单克隆抗体和乳胶微球标记的DNP-BSA。
当样品中含有His-Tag蛋白时，目标蛋白会优先与标记抗体结合，占据抗体的结合位点，从而阻止标记抗体与检测线上的重组蛋白结合。样品中His-Tag蛋白浓度越高，检测线显色越浅。本产品检测范围为1~25μg/mL，重复性CV≤15%，正确度相对偏差在±15%以内，能够为科研工作者提供可靠的半定量检测结果。
核心优势
与传统方法的时间对比
使用本产品可将蛋白检测时间从1天缩短至仅需20分钟！
产品信息
| 货号 | 规格 | 保存条件 | 保质期 |
|---|---|---|---|
| RA10081 | 10T | 常温密封干燥 | 12个月 |
| RA10081 | 50T | 常温密封干燥 | 12个月 |
组成成分：独立铝箔袋包装的His-Tag检测卡、层析液、详细产品说明书
广泛应用场景
- 重组蛋白表达克隆筛选：快速鉴定大量转化子中的高表达阳性克隆，避免在低表达克隆上浪费时间和试剂
- 表达条件优化实验：快速比较不同诱导温度、诱导时长、诱导剂浓度对蛋白表达量的影响
- 蛋白纯化过程追踪：实时监测上样液、穿透液、洗脱液和收集液中的目标蛋白含量
- 真核细胞转染效率检测：快速评估不同转染试剂和转染方法对目的蛋白表达的影响
- 蛋白样品质量验证：快速确认蛋白样品中标签的完整性，为后续功能实验提供质量保障
- 大规模生产质控：适用于重组蛋白药物、工业酶制剂等生产过程中的中间产物快速检测
操作流程
- 准备工作：从密封铝箔袋中取出检测卡，水平放置于干燥的实验台面上；将冷藏的检测样本平衡至室温
- 样品预处理：取80μL层析液转移至空离心管中，加入20μL待测样品，涡旋振荡器混合10秒钟
- 样品加载：使用微量移液器从处理好的混合液中吸取70μL，缓慢滴加到检测卡的进样孔中
- 结果判读：室温下静置15分钟后观察并记录结果
样品稀释指南：对于浓度已知的样品，直接稀释至约5μg/mL即可；对于浓度未知的原核表达系统样品，建议先进行25倍稀释；对于真核表达系统样品，建议先进行5倍稀释。如果检测结果超出线性范围，需进一步调整稀释倍数至检测线显色强度在线性范围之内。
低丰度蛋白检测提示：对于表达丰度极低的样品，可直接使用未经稀释的样本原液进行检测，但必须同时设置相同基质的阴性对照，通过比较检测线显色强度的差异来判断结果。
结果判读
质控线(C)和检测线(T)同时出现红色条带，且检测线显色强度与阴性对照一致，表明样品中不含His-Tag蛋白或其浓度低于1μg/mL的检测下限。
质控线(C)显色，检测线(T)不显色或显色强度明显弱于阴性对照，表明样品中含有His-Tag蛋白。检测线颜色越浅，代表蛋白浓度越高。
质控线(C)未出现红色条带，无论检测线(T)是否显色，均表明本次检测无效。可能原因包括试剂失效、操作不当或加样量不足。
常见试剂兼容性
本产品对多种实验室常用缓冲液成分具有良好的耐受性，可直接检测大多数常规制备的蛋白样品，无需进行额外的样品处理。
| 试剂名称 | 浓度上限 |
|---|---|
| NaCl | 0.5M |
| KCl | 0.5M |
| Urea | 0.4M |
| Triton X-100 | 1% |
| Tween-20 | 1% |
| 咪唑 | 2.5M |
| 试剂名称 | 浓度上限 |
|---|---|
| NP-40 | 1% |
| CHAPS | 1% |
| SDS | 0.2% |
| EDTA | 5mM |
| 甘油 | 10% |
| RIPA | 100% |
注意事项
- 本产品仅用于科学研究目的，严禁应用于人体临床诊断或治疗。
- 本试剂为一次性使用产品，请勿重复使用。
- 本试剂是半定量检测试剂，不能作为准确定量试剂使用。
- 检测卡进行检测时，应避免震动，保持静置状态。
- 不同批次的试剂盒组件不能混用，以免影响检测结果。
- 建议试剂和层析液即开即用，开封后尽快使用完毕。
- 实验过程中产生的所有废弃物应按照实验室生物安全管理规定进行分类处理。
常见问题及解决
| 现象 | 可能的原因 | 解决方法 |
|---|---|---|
| 检测线与阴性对照相比无明显显色削弱 | 样品中不含目标蛋白 样品浓度低于检测下限 |
确认表达载体和检测卡匹配 使用原液进行检测并设置阴性对照 |
| 检测线显色非常浅或完全不显色 | 样品浓度高于工作浓度范围上限 样品浓度过高导致完全竞争 |
对样品进行更高倍数稀释后重新检测 |
| 质控线无可见条带 | 操作步骤有误 检测卡已过有效期 检测卡保存不当 加样量不足 |
严格按照说明书重新操作 更换有效期内的新检测卡 确保检测卡于常温密封干燥保存 确保准确加入70μL处理好的样品 |
