产品参数
| 全称 | Tumor Necrosis Factor Alpha |
|---|---|
| 别称 | DIF, TNF-alpha, TNFA, TNFSF2,TNF,TNFa |
| 反应类型 | Sandwich |
| 反应种属 | Mouse |
| 检测范围 | 1.56-100pg/mL |
| 灵敏度 | 0.93pg/mL |
| 样本类型 | Serum,plasma and other biological fluids |
| 样本体积 | 100μL |
| 检测波长 | OD450 |
| 运输温度 | 2-8°C |
| 特异性 | The kit detected Mouse TNF-α in the samples and no significant cross-species reactions were found |
| 酶标板类型 | 12 x 8孔 96T平底酶标板 |
检测原理
| 本试产品采用双抗体夹心ELISA法。用抗Mouse TNF-α抗体包被于酶标板上，实验时样品（或标准品）中的Mouse TNF-α会与包被抗体结合。后依次加入生物素化的抗Mouse TNF-α抗体和HRP酶标记的亲和素，抗Mouse TNF-α抗体与结合在包被抗体上的Mouse TNF-α结合，生物素与亲和素特异性结合而形成免疫复合物，游离的成分被洗去。加入显色底物(TMB)，TMB在HRP酶的催化下呈现蓝色，加终止液后变成黄色。用酶标仪在450 nm波长处测OD值，Mouse TNF-α浓度与OD450 OD值之间呈正比，通过绘制标准曲线计算出样品中Mouse TNF-α的浓度。 |
ELISA试剂盒组份
收到货物后，请立即开箱，并按照说明书中的建议进行储存。
| 组份 | 规格 | 储存条件及注意事项 |
|---|---|---|
| Micro Plate | 96T: 8 wells×12 strips 48T: 8 wells×6 strips | 未开封：-20°C，12个月 未使用：将其放回铝箔袋并密封，储存在 -20°C。 |
| Reference Standard | 96T: 2 vials 48T: 1 vial | 未开封：-20°C，12个月 每次实验请使用新鲜溶解的标准品。溶解后未使用的标准品请丢弃。 |
| Biotinylated Detection Ab Concentrate (100×) | 96T: 120μL×1 vial 48T: 60μL×1 vial | 未开封：-20°C，12个月 未使用：请将浓缩液密封并储存在 -20°C，工作液请丢弃。 |
| HRP Conjugate Concentrate (100×) | 96T: 120μL×1 vial 48T: 60μL×1 vial | 未开封：-20°C（避光保存），12个月 未使用：请将浓缩液密封并储存在 -20°C，工作液请丢弃。 |
| Biotinylated Detection Ab Diluent | 14mL×1 | 2-8℃, 12个月 |
| HRP Conjugate Diluent | 14mL×1 | 2-8℃, 12个月 |
| Reference Standard & Sample Diluent | 20mL×1 | 2-8℃, 12个月 |
| Washing Buffer Concentrate (25×) | 30mL×1 | 2-8℃, 12个月 |
| Substrate Reagent(TMB) | 10mL×1 | 2 - 8°C（避光保存），12个月 |
| Stop Solution | 7mL×1 | 2-8°C/室温 |
检测步骤
典型数据
Mouse TNF-α ELISA 标准曲线
典型数据仅作参考，每次实验都应重新绘制曲线。建议使用Logistics函数进行拟合。
精密度
批内精密度（板内精密度）：在同一块板上对低、中、高浓度的Mouse TNF-α各进行20次测量。
批间精密度（板间精密度）：在3块不同的板上，对含有低、中、高浓度Mouse TNF-α的样本，每块板各进行20次检测。
| 批内精密度 | 批间精密度 | |||||
|---|---|---|---|---|---|---|
| 样本 | 1 | 2 | 3 | 1 | 2 | 3 |
| n | 20 | 20 | 20 | 20 | 20 | 20 |
| 平均值 (pg/mL) | 4.69 | 10.14 | 38.31 | 4.35 | 10.81 | 34.54 |
| 标准差 | 0.26 | 0.55 | 1.96 | 0.26 | 0.49 | 1.61 |
| CV(%) | 5.62 | 5.41 | 5.11 | 5.99 | 4.54 | 4.65 |
回收率
评估了在不同基质样本中添加三种不同浓度的Mouse TNF-α的回收率。
| 样本类型 | 范围 (%) | 平均回收率 (%) |
|---|---|---|
| Serum(n=8) | 83-97 | 90 |
| EDTA plasma (n=8) | 93-108 | 100 |
| Cell culture media (n=8) | 86-99 | 91 |
线性
向样本中添加高浓度的Mouse TNF-α，然后用标准品和样本稀释液对其进行稀释，使样本的值处于检测范围内。
