鼠IgG(Fc片段)快速检测卡
抗体表达检测专用 · 15分钟出结果 · 乳胶微球标记技术
产品概述
鼠IgG(Fc片段)快速检测卡采用乳胶微球标记的免疫层析技术,基于双抗体夹心原理开发而成。本试剂专门用于检测样本中的鼠IgG抗体或带有鼠Fc片段的重组蛋白产物。测试时,样本中的鼠Fc片段与标记抗体结合形成反应复合物,借助毛细作用移行至检测区(T线),与包被的鼠Fc二抗结合形成红色条带。
本产品检测范围为1~20μg/mL,检测线颜色深浅与样本中鼠Fc片段浓度呈正比。产品重复性CV≤15%,正确度相对偏差在±15%以内,能够为抗体表达水平提供可靠的半定量检测结果。
核心优势
与传统方法的时间对比
使用本产品可将抗体检测时间从数小时缩短至仅需20分钟!
产品信息
| 货号 | 规格 | 保存条件 | 保质期 |
|---|---|---|---|
| RA10083 | 10T | 2~30℃密封干燥 | 12个月 |
| RA10083 | 50T | 2~30℃密封干燥 | 12个月 |
组成成分:独立铝箔袋包装的鼠IgG(Fc片段)检测卡、滴瓶装层析液、详细产品说明书
广泛应用场景
- 鼠源抗体表达水平检测:快速检测杂交瘤细胞培养上清中的抗体表达量
- 重组蛋白表达筛选:快速筛选带有鼠Fc片段的重组蛋白高表达克隆
- 抗体纯化过程监控:实时监测纯化各步骤中的抗体含量,指导纯化方案优化
- 细胞培养上清检测:直接检测细胞培养上清中的抗体浓度,无需样品预处理
- 抗体样品质量验证:快速确认抗体样品的完整性和浓度,为后续实验提供质量保障
- 大规模生产质控:适用于抗体药物、重组蛋白等大规模生产过程中的中间产物快速检测
操作流程
- 准备工作:使用前仔细阅读说明书,将冷藏的检测样本平衡至室温;检查并确保试剂卡产品信息及批号与外包材信息一致
- 取出检测卡:撕开铝箔袋取出检测卡,置于水平桌面
- 样品稀释:用移液器吸取95μL层析液,转移至空离心管中;再吸取5μL样本,转移至层析液管中,共计100μL混合液,涡旋振荡器混合10秒钟
- 加样:用移液器从处理好样品的层析液管里取70μL加到检测卡的进样孔
- 结果判读:室温下静置15分钟后观察并记录结果
样品稀释指南:若待测标签蛋白浓度已知,直接稀释至5μg/mL;针对低表达样本建议原液检测;若预估标签蛋白表达量较高,建议检测前对样本进行适当稀释。若检测结果超出试剂线性范围,需进一步调整稀释倍数。
低丰度样本检测:低丰度重组标签蛋白稀释后可能低于检测下限导致假阴性,此时可用未经稀释的样本原液进行检测,但须设置与样本相同基质的阴性对照。
结果判读
质控线(C)和检测线(T)同时出现红色条带,表明样品中含有鼠IgG抗体或带有鼠Fc片段的重组蛋白。检测线颜色越深,代表蛋白浓度越高。
仅质控线(C)出现红色条带,检测线(T)无明显显色,表明样品中不含目标蛋白,或其浓度低于检测下限。
质控线(C)未出现红色条带,无论检测线(T)是否显色,均表明本次检测无效。可能原因包括试剂失效、操作不当或加样量不足。
检测范围参考
| 浓度(μg/mL) | 显色强度参考 |
|---|---|
| 20 | 深红色条带 |
| 10 | 红色条带 |
| 5 | 中等红色条带 |
| 2.5 | 浅红色条带 |
| 1 | 极浅红色条带 |
| 0 | 无条带 |
常见试剂兼容性
本产品对多种实验室常用缓冲液成分具有良好的耐受性,可直接检测大多数常规制备的蛋白样品。
| 试剂名称 | 浓度上限 |
|---|---|
| NaCl | 0.5M |
| KCl | 0.5M |
| Urea | 0.4M |
| Triton X-100 | 1% |
| Tween-20 | 1% |
| SDS | 0.2% |
| 试剂名称 | 浓度上限 |
|---|---|
| NP-40 | 1% |
| CHAPS | 1% |
| EDTA | 5mM |
| 甘油 | 10% |
| 咪唑 | 0.5M |
| RIPA裂解液 | 100% |
常见问题及解决
| 现象 | 可能的原因 | 解决方法 |
|---|---|---|
| 质控线不显色 | 检测卡已失效 检测卡开袋后受潮 操作步骤有误 |
使用有效期内的新检测卡 检测卡开袋后立即使用 严格按照说明书重新操作 |
| 检测线无可见条带 | 样品中不含目标蛋白 样品浓度低于检测下限 样品稀释倍数过高 |
确认样品类型与检测卡匹配 降低稀释倍数或使用原液检测 调整稀释倍数后重新检测 |
| 检测线显色过深 | 样品浓度过高 超出线性检测范围 |
对样品进行更高倍数稀释后重新检测 |
| 检测背景较深 | 样品中存在干扰成分 缓冲液条件异常 |
用PBS或层析液适当稀释样品后重新检测 |
注意事项
- 本试剂仅用于鼠IgG抗体或带有鼠Fc片段的重组蛋白产物的检测,过期产品请勿使用。
- 试剂为一次性使用,不得二次使用。
- 本试剂是半定量检测,不能作为准确定量试剂使用。
- 技术原因、操作失误及其他样本因素都可能引起检测结果错误。
- 本试剂检测结果只能作为辅助工具,应结合实际情况综合判断。如检测结果出现异常,则需要进行进一步的排查。
- 检测卡进行检测时,应避免震动,保持静置。
- 不同批次的试剂盒组件不能混用。
- 若质控线不显色,表明检测结果无效。
- 建议试剂和层析液即开即用。
