免疫组化（IHC）常用试剂配方
10% 中性缓冲福尔马林（10% NBF）
4% 甲醛（w/v），0.01 M 磷酸盐
配方（1 L）
| 成分 | 用量 |
|---|---|
| 40% 甲醛原液 | 100 mL |
| NaH₂PO₄·H₂O | 0.4 g |
| Na₂HPO₄ | 0.65 g |
| 去离子水 | 补足至 1 L |
pH：
7.2-7.4（NaOH 或 HCl 微调）
保存：
室温 1 个月；4 ℃ 可延长至 3 个月
使用：
组织浸泡 24 h，随后流水冲洗 2 h
0.01 M 柠檬酸盐缓冲液
10 mM 柠檬酸三钠，1.8 mM 柠檬酸
配方（500 mL）
| 成分 | 用量 |
|---|---|
| 0.1 M 柠檬酸三钠 | 9 mL |
| 0.1 M 柠檬酸 | 41 mL |
| 去离子水 | 补足至 500 mL |
pH：
6.0 ± 0.05
保存：
4 ℃ 1 个月
使用：
切片置于修复盒，高压 121 ℃ 2 min 或微波 98 ℃ 10 min，自然冷却至室温
3% H₂O₂ 甲醇溶液
3%（v/v）H₂O₂
配方（10 mL，现配现用）
| 成分 | 用量 |
|---|---|
| 30% H₂O₂ | 1 mL |
| 甲醇 | 9 mL |
使用：
室温孵育 10 min，PBS 冲洗 3 × 3 min
注意：此试剂需现配现用
5% 正常血清（与二抗同源）
5%（v/v）
配方（1 mL）
| 成分 | 用量 |
|---|---|
| 正常血清 | 50 μL |
| PBS | 950 μL |
使用：
室温封闭 30 min，甩干不洗
PBS-BT
1% BSA，0.05% Tween-20
配方（100 mL）
| 成分 | 用量 |
|---|---|
| BSA | 1 g |
| Tween-20 | 50 μL |
| PBS | 补足至 100 mL |
保存：
4 ℃ ≤ 1 周；长期分装 -20 ℃冻存
使用：
一抗、二抗均用此液稀释，建议起始浓度 一抗 1:100，二抗 1:200
DAB-H₂O₂ 工作液
0.5 mg mL⁻¹ DAB，0.003% H₂O₂
配方（5 mL，现配）
| 成分 | 用量 |
|---|---|
| DAB 母液（50 mg/100 mL TB, pH 7.6, 0.22 μm 过滤） | 5 mL |
| 30% H₂O₂ | 5 μL |
使用：
滴加覆盖组织，室温 1-5 min（镜下控制），流水终止
注意：此试剂需现配现用
Harris 苏木素
0.4% 苏木素（w/v），0.08% 氧化汞
配方（500 mL）
| 成分 | 用量 |
|---|---|
| 苏木素 | 2 g |
| 无水乙醇 | 20 mL |
| 硫酸铝钾 | 40 g |
| 去离子水 | 480 mL |
| 氧化汞 | 1 g（缓慢加入，充分搅拌） |
制备：
过滤，静置熟化 24 h
保存：
棕色瓶室温 6 个月
使用：
工作液 1:1 去离子水稀释，染核 30 s-1 min，流水返蓝 5 min
缓冲液
PBS（0.01 M, pH 7.4）
| 成分 | 用量（1 L） |
|---|---|
| NaCl | 8.0 g |
| KCl | 0.2 g |
| Na₂HPO₄·12H₂O | 2.9 g |
| KH₂PO₄ | 0.2 g |
| 去离子水 | 1 L |
制备：
高压灭菌，室温保存
TBS-T（0.05 M Tris, 0.15 M NaCl, 0.05% Tween-20, pH 7.6）
| 成分 | 用量（1 L） |
|---|---|
| Tris base | 6.05 g |
| NaCl | 8.8 g |
| 去离子水 | 900 mL → 调 pH 7.6 → 补足 1 L |
| Tween-20 | 0.5 mL |
封片剂
中性树胶
使用：
切片经梯度乙醇脱水（70% → 80% → 95% → 100% ×2，各 2 min）及二甲苯透明（2 × 3 min）后，滴加适量中性树胶，加盖玻片封固
 | Jeff Jeff是EnkiLife的病理产品专家，专注免疫组化检测和产品开发12年+，对用户需求有着极高的洞察力，致力于帮助我们的客户做好免疫组化实验，加速科学发现。 |