技术指南|细胞培养之细胞复苏篇
1. 细胞复苏一般步骤
(1)将冻存管从液氮中取出，快速放入37°C水浴锅中，轻摇冻存管使之溶解；
(2)溶解后把细胞悬液转移到含有5ml培养基的离心管中，离心收集细胞，室温1000rpm 离心3 min，弃上清；
(3)加入新鲜的对应细胞的完全培养基重悬细胞。然后将细胞悬液接种到含6-8ml完全培养基的培养瓶中轻轻吹打混匀, 37°C、5% CO2饱和湿度条件下培养过夜。第二天显微镜下观察细胞生长情况和细胞密度。
2.可否使用与原先培养条件不同的培养基？
不能。每一细胞株均有其特定使用且已适应的细胞培养基，如果骤然使用和原先提供的培养条件不同的培养基，细胞大都无法立即适应，造成细胞无法存活。 如需要更换其他的培养基条件，需要进行细胞的逐步适应实验，保证细胞的良好生长状态。
3. 常规的动物细胞离心处理，其离心速率应为多少转速？
动物细胞的离心速率一般为300xg (约1,000rpm)，5-10min，过高的转速，将造成细胞死亡。