多重荧光免疫组化技术 (mIHC)
酪酰胺信号放大(TSA,Tyramide signal amplification)技术的问世,为荧光多重染色提供了高效的信号放大解决方案,有效破解了传统技术面临的诸多局限。其核心原理在于,一抗与靶点特异性结合,偶联有辣根过氧化物酶 HRP 的二抗与一抗结合后,向反应体系中引入携带荧光基团的酪胺分子。荧光标记的酪胺盐在 HRP 催化过氧化氢(H2O2)的条件下会产生共价键结合位点,进而引发大量酶促反应。这些反应产物能够与周围蛋白(如色氨酸、组氨酸、酪氨酸残基所在的蛋白)相结合,在抗原-抗体结合处堆积大量荧光素,使信号强度实现数十倍的提升,即便低丰度靶点也能被精准检测。